0 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Методика определения группы крови и резусфактора

Методики определения групп крови, описание таблицы

Практически каждый человек хотя бы единожды за свою жизнь проходил тест для установления принадлежности группы крови. О методах проведения данного анализа и об их достоверности пойдет речь далее.

Для чего проводится диагностика?

Группа крови – это определенный ряд антигенов, размещенных на поверхности эритроцитов, которые и определяют их специфичность. Таких антигенов известно очень много, поэтому принято единую классификацию крови по АВО и резус-фактору.

Этот показатель в обязательном порядке определяется у пациентов перед хирургической операцией, военным, полицейским и другим категориям людей, которые могут потребовать срочного переливания крови.

Стандартная методика определения группы крови

Самый распространенный метод исследования данного показателя – это способ с применением стандартной сыворотки. Эта диагностика определяет общепринятые антигены по системе АВО.

Изогеммагглютинирующая сыворотка представляет собой совокупность специальных антител к наружным частичкам эритроцитов. Если находится совместимый антиген, на который могут воздействовать антитела, то формируется комплекс, способствующий началу иммунно-защитного механизма. Вследствие этого происходит склеивание эритроцитарных клеток крови (агглютинация). Если подобное происходит, то делается вывод о несовместимости крови.

Данные сыворотки изготавливаются из крови доноров по специальной системе, подразумевающая под собой извлечение плазмы, в которой и содержать антитела, после чего ее разводят изотоником – хлорид натрия, это проходит в несколько этапов:

  • В емкость наливают 1 мл воды, в которой растворено 0,9% обычной соли.
  • В эту же пробирку вносят такое же количество разведенной плазмы.
  • Затем 1 мл данной жидкости вносят в емкость с изотоником.

Процесс позволяет получить соотношение 1:256. Если методика разведения будет нарушена, то есть большая вероятность получения ошибочных результатов.

Проведение исследования

На поверхность планшета наносится 0,1 мл каждой сыворотки в район, где нанесена нужная пометка. За тем берется исследуемая кровь объемом 0,01 мл для каждого образца. И затем проводится смешивание каждой капли сыворотки с кровью.

Спустя пять минут проводят диагностику. Тестирование считается положительным, если прошла реакция агглютинации. Исходя из результатов анализов, выполняется построение таблицы, в которую они и заносятся.

Таблица результатов теста на группу крови с применением стандартных сывороток.

Методика перекрестных реакций

В этом случае, чтобы определить агглютиноген используют цоликлоны. Иначе стандартные сыворотки с технологией параллельного выяснения благодаря эталонным эритроцитарным клеткам.

Два этих способа весьма сходны между собой. Но различия все, же есть.

На поверхность, на которую предварительно помещаются различные сыворотки, наносят по небольшой капле обычных эритроцитов. Затем кровь разделяют на фракции при помощи центрифуги. И форменные элементы добавляют к стандартным сывороткам, а плазменную часть – к стандартным эритроцитарным клеткам. Оценивание результатов проводят через пять минут и показатели отмечают в таблице.

Благодаря данной методике исключаются ошибки при исследовании.

Метод с использованием цоликлонов

Если нет возможности определить группу крови стандартными сыворотками, то используют данную методику.

Цоликлоны – гибридные антитела, которые получают из в-лимфоцитов крови мышей.

Последовательность проведения диагностики такая:

  1. После нанесения отметок на планшет, которые соответствуют виду цоликлона, наносится раствор.
  2. К каждому образцу цоликлона вносят одну каплю диагностированной крови.
  3. Оценка результатов через пять минут.
  4. Для данной методики необходимо соблюдать специальные условия. Они включают в себя пригодность цоликлонов, температуру в помещении и уровень влажности.

Результаты анализов считаются позитивными в том случае, когда при смешивании данных фракций наблюдается реакция агглютинации. Если подобное произошло в двух образцах, то считается, что кровь относится к четвертой группе. Если реакция не наблюдается вовсе, то к первой. Диагностические ошибки в данной методике встречаются не часто.

Быстрый способ «Эритротест»

Выше перечисленные способы используются в медицине уже долгое время и распространены по всему миру. Но ввиду того, что отрасль постоянно развивается, вводятся быстрые диагностические методы по установлению принадлежности к группе крови. Таким нововведением считается и «Эритротест».

Чтобы определить показатель данным способом необходимо иметь следующее оборудование:

  • Стандартный планшет с пятью лунками
  • Скарификатор для прокола и получения биологической жидкости
  • Стеклянная пипетка с резиновой грушей
  • Пипетка для забора реактивов
  • Палочки для смешивания компонентов

Основное преимущество эритротеста состоит в том, что исследование не требует дополнительных условий и доступно в тот момент, когда проведение стандартной диагностики невозможно.
Последовательность проведения
В углублениях планшета размещают цоликлоны к антигенам поверхностного типа и основному, который отвечает за наследственную передачу резус-фактора. В последнюю лунку добавляют контрольную сыворотку, которая исключит ошибочный результат и верно укажет на принадлежность к той или иной группе.

Оценивание результатов анализа проводится с помощью таблицы, в ней указываются возможные результаты тестирования.

Классификация по системе АВО

Группа крови, определение ее проводится исходя из специально разработанных норм. Существует определенная таблица, которая характеризует каждую группу крови.

ГруппыОписание
I (0)Эритроцитарные антигенные качества не наблюдаются
II (А)Присутствие антигена А
III (В)Наличие на поверхности эритроцитарных клеток антигена В
IV (АВ)Присутствие обоих антигенов

Видео: Методы определения групп крови:

Методика определения группы крови и резусфактора

Группа крови – это генетически обусловленный биологический признак человека, который определяется набором агглютиногенов (антигенов) и эритроцитов крови человека и агглютининов (антитела к антигенам) в плазме крови человека.

Агглютиногены – это вещества белковой природы, которые попадая в чужеродный организм иммунизируют его, вызывая выработку против себя антител. В крови у человека находится агглютиноген А и В, которые находятся в форменных элементах крови.

Агглютинины – это молекулы гамма-глобулинов, которые при встрече с одноимёнными агглютиногенами вступают в специфическую реакцию. В плазме крови у человека находится агглютинин а и в.

Группы крови по системе АВО

1) О (I) ав = встречается у 32-41%;

2) А (II) в = встречается у 38-40%

3) В (III) а = встречается у 18-20%;

4) АВ (IV) = встречается у 3-8%.

Определение группы крови

Группа крови определяется по перекрёстному методу с прямой и обратной реакцией.

По прямой реакции с помощью заведомо известных агглютининов в сыворотках определяют наличие в крови у человека агглютиногенов.

Агглютиногены также определяются с помощью специальных сывороток, которые называются цоликлонов – это антитела против агглютиногенов а и В, полученных синтетическим путем (анти А – красная жидкость; анти В – синяя жидкость).

Методика проведения прямой реакции

Используется для определения агглютиногенов с помощью цоликлонов анти А и анти В.

В углубления на планшете наносят по капле исследуемой крови в 2 углубления и в 5 раз больше каплю цоликлона. Капли смешивают в течение 3-5 минут и считают результат.

1 вариант – реакция агглютинации с цоликлоном анти А и анти В отсутствует =>в исследуемой крови агглютиногены А и В отсутствуют;

2 вариант – реакция агглютинации с цоликлоном анти А положительна, а с цоликлоном анти В отрицательна =>IIгруппа крови;

3 вариант – реакция агглютинации с цоликлоном анти А отрицательна, а с цоликлоном анти В положительна =>IIIгруппа крови;

4 вариант – реакция агглютинации с цоликлоном анти А и анти В положительна =>IVгруппа крови.

Методика проведения обратной реакции

С помощью заведомо известных агглютиногенов в сыворотке исследуемой крови определяется наличие агглютининов.

В 2 пробирки наносят по 5-6мл крови IIи IIIгруппы. Кровь отстаивают, эритроциты оседают на дно, а сверху остаётся сыворотка. Сыворотку и пробирок сливают, а эритроциты дважды отмывают физиологическим раствором.

У больного в пробирку набирают 5-6мл, отстаивают, эритроциты оседают. В сыворотке ищем агглютинины.

В углубления на планшете наносят каплю эритроцитов а, а во второе углубление – эритроциты в и добавляют в 10 раз больше каплю сыворотки исследуемой крови. Капли смешивают в течение 3-5 минут и считают результат.

Читать еще:  Лекарство для мужской потенции названия

1 вариант – реакция агглютинации с эритроцитами а и в положительна => имеются агглютинины а и в;

2 вариант – реакция агглютинации с эритроцитами а отрицательна, а с эритроцитами в положительна => имеются агглютинины в;

3 вариант – реакция агглютинации с эритроцитами а положительна, а с эритроцитами в отрицательна =>имеются агглютинины а;

4 вариант – реакция агглютинации с эритроцитами а и в отрицательна =>агглютинины отсутствуют.

Резус-фактор – это антиген, содержащийся в крови макаки-резус и людей и обусловливающий совместимость крови матери и плода, а также донора и того, кому переливают кровь. Бывает положительным и отрицательным.

Если не учитывать наличие резус-фактора, то можно получить опасное осложнение резус-конфликт, который может закончиться летальным исходом.

Определяется у каждого человека или с помощью универсальной антирезусной сыворотки, в которой имеются антитела против резус-фактора, или с помощью цоликлона анти Dсуперполного.

В углубления на планшете наносят каплю исследуемой крови и в 5 раз больше цоликлона анти Dсуперполного. Капли смешивают и через 3-5 минут считают результат.

Если появились хлопья => резус-фактор положительный;

Если в растворе гомогенное окрашивание => резус-фактор отрицательный.

Это серьёзная операция по трансплантации чужеродной ткани.

Перед переливанием крови определяют показания и противопоказания к переливанию крови, определяют вид компонентов крови и методику переливания.

Цели переливания крови:

1) Возмещение утраченной крови;

2) Гемостатическая цель;

3) Стимуляция гемопоэза;

5) Повышение иммунитета;

Показания могут быть абсолютными и относительными.

1) Острая кровопотеря опасная для жизни (30, 40, 50№);

2) Продолжающиеся кровотечения;

3) Длительная кровавая операция;

4) Тяжёлые хирургические инфекции;

5) Тяжёлые анемии.

1) Тяжёлые поражения головного мозга;

2) Тяжёлые заболевания почек и печени;

3) Заболевания вен и тромбофлебит, варикозная болезнь;

4) Тяжёлые заболевания ЦНС;

5) Туберкулёз лёгких;

6) Бронхиальная астма;

7) Аллергические реакции.

Методы переливания крови:

1) Прямое переливание:

Это переливание крови непосредственно из сосудистого русла донора к сосудистому руслу реципиента.

В настоящее время этот метод официально не используется.

2) Непрямое переливание:

У донора берут кровь, обследуют её, готовят из неё компоненты крови, консервируют, а затем по запросу отдают в лечебное учреждение. Сроки хранения = 21 день.

Это переливание собственной крови больного.

Это введение в сосудистое русло больного его же крови, взятой из его серозных полостей.

5) Использование донорской крови в аппаратах искусственного кровообращения.

Последовательность действий при переливании крови

1) Определить показания к переливанию крови.

2) Подготовить больного к переливанию крови (определение группы крови, резус-фактора, общий анализ крови за 1-2 дня до переливания, общий анализ мочи).

3) Определить годность крови или компонента крови к переливанию (срок годности, состав плазмы и её прозрачность).

Плазма не должна иметь хлопьев и плёнок, не должна быть мутной и розовой, т.к. розовое окрашивание говорит о разрушенных эритроцитах. В эритроцитарной взвеси или крови не должно быть сгустков. Тщательно осматривается паспорт крови или её компонентов. Ёмкость не должна быть повреждена.

4) Перед переливанием определить кровь, полученную из станции переливания крови.

5) Провести пробы на совместимость крови или её компонента донора и реципиента.

1) Проба на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента:

В углубление на планшете наносят каплю донорской крови или эритроцитов и в 10 раз больше каплю сыворотки реципиента. Смешивают капли в течение 3-5 минут.

Если гомогенное окрашивание без хлопьев => кровь донора и реципиента совместима по группе.

2) Проба на совместимость по резус-фактору:

В пробирку наносят каплю крови донора, 2 капли сыворотки реципиента и 1 каплю 33% полиглюкина. Смешивают капли в течение 3-5 минут, а затем добавляют 4-6мл физиологического раствора.

Если жидкость без хлопьев => кровь по резус-фактору донора и реципиента совместима.

Если видны хлопья => кровь по резус-фактору не совместима.

3) Биологическая проба:

К больному подключают систему, затем подключают кровь или компоненты крови. Реципиенту переливают 3 раза с перерывом в 3-5 минут струйно или быстрыми каплями по 15-20мл донорской крови.

При отсутствии жалоб со стороны больного капельно переливают всю оставшуюся кровь, но после переливания оставляют 10-15мл.

После переливания крови или компонентов больной должен лежать. У больного постоянно контролируют пульс, АД и температуру. Если больной сходил в туалет, то смотрят мочу. На второй день проводят общий анализ крови и общий анализ мочи.

При переливании крови больному под наркозом проводят пробу Гемпеля. Из другой вены берут кровь, центрифугируют и оценивают результат.

1) Осложнения механического характера, связанные с погрешностями при переливании крови:

· Острое расширение сердца, сердечно-сосудистая слабость, остановка сердца;

· Тромбоз сосудов, мозга или легочной артерии;

2) Осложнённые реактивные:

Эти реакции сопровождаются повышением температуры.

Могут быть лёгкой (повышение температуры на один градус, головная боль, боль в мышцах, тахикардия и тошнота в течение 2 часов); средней (повышение температуры на два градуса, озноб, одышка в течение 1-2 дней); тяжёлой (повышение температуры на три градуса в течение нескольких дней, нарушение сознания). Проводится инфузионная терапия.

Сопровождаются тошнотой, рвотой, бронхоспазмом, сыпью, резким повышением температуры.

Развивается быстро, сопровождается угнетением сознания, быстрым снижением артериального давления, остановкой сердца и дыхания.

При анафилактическом шоке надо прекратить переливание, поставить физиологический раствор. В/в вводят Адреналин 0,1% 1мл и кортикостероидные гормоны (Гидрокортизон 125-350мл; Преднизолон 60-90мг), а затем антигистаминные (Супрастин 1 табл. 3–4 раза в день; Тавегил 2мг 2 раза в день). При необходимости провести реанимационные мероприятия.

Развивается в результате переливания несовместимой донорской крови по группе или резус-фактору. Развивается после переливания через 6-24ч.

Больной жалуется на тошноту, рвоту, боли в груди, страх, боли в пояснице. Необходим гемодиализ.

Развивается при массивном переливании крови или её компонентов с консервантом лимоннокислого натрия. При его избыточном количестве разрушаются соли кальция, что вызывает развитие у больного судорожного синдрома.

Для его профилактики после переливания крови или его компонентов с консервантом вводят в/в 10% 10мл глюконата кальция.

Как определить резус-фактор крови: методы анализа и интерпретация результатов

Стоимость услуги по определению резус-принадлежности обычно составляет несколько сотен рублей.

Резус-принадлежность, как и группу крови, следует знать каждому: в экстремальных ситуациях это знание может спасти жизнь.

Сдать биоматериал в рамках оказания диагностических медуслуг можно не выходя из дома — удобно и быстро.

Пройти функциональное и визуальное обследования можно в удобном для вас медицинском центре.

Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, повышает вероятность получения достоверных результатов.

Спецпредложения, скидки и акции частных лабораторий помогут сэкономить на медицинских услугах.

К выбору лаборатории для сдачи биоматериала следует подойти ответственно. Желательно, чтобы медицинский центр был хорошо оснащен.

Наверное, каждый знает, что кровь человека имеет определенные характеристики. Первое, что приходит на ум, — это группа: I, II, III, IV. Вторая важная характеристика — резус-фактор. Но если о значении группы крови большинство имеет хотя бы базовое представление, то значение слова «резус» для многих остается непонятным.

Что же это за понятие и почему оно важно для каждого человека?

Что такое резус-фактор и почему о своем «статусе» нужно знать?

На самом деле, все довольно просто.

Наша кровь состоит из клеток, эритроцитов, на поверхности которых может быть специфический белок (антиген) — тот самый резус — либо его может не быть. В первом случае говорят о том, что кровь резус-положительная, во втором — резус-отрицательная. По статистике, 80–85% населения Земли имеют этот специфический белок. Люди, у которых антиген отсутствует, имеют одну важную особенность: при переливании (трансфузии) им «положительной» крови или при беременности, в случае вынашивания плода с противоположным резусом, организм может начать «атаку» на инородный белок. Это чревато серьезными осложнениями, вплоть до гибели пациента (при переливании) или ребенка (при вынашивании).

Читать еще:  Мужские афродизиаки и рецепты для потенции

Поэтому резус-фактор нельзя не учитывать при планировании материнства или в экстремальных жизненных ситуациях, когда человеку необходимо стать донором или реципиентом крови.

Как узнать свой резус-фактор: положительный vs отрицательный

Поскольку резус — свойство крови, для того, чтобы определить его наличие или отсутствие, проводят анализ именно этого биоматериала.

Самый известный метод исследования — определение резус-фактора цоликлонами. В лабораторных условиях небольшое количество крови смешивают со специальной сывороткой. Если при этом начинается склеивание эритроцитов (агглютинация), резус считают положительным, в противоположном случае — отрицательным.

Есть и более совершенные методы, например гель-фильтрация. Кровь помещают в пробирку со специальным гелем с реагентами. При отрицательном резусе она проходит до самого дна, при положительном — начинается процесс склеивания и биоматериал остается в верхней части колбы. Данный метод более чувствительный и наглядный и в настоящее время применяется почти в 60% мировых клиник.

Ошибки при определении резус-фактора в современных условиях чрезвычайно редки, но все же встречаются. Они могут иметь технический характер, в частности, к ним приводит использование старых образцов крови, непрофессионализм персонала поликлиники (путаница с пробирками, неверная оценка результатов). Встречаются и ошибки по биологическим причинам: при некоторых заболеваниях печени, почек в крови могут присутствовать посторонние белки или бактерии, способные исказить результат.

Когда проводят определение резус-фактора крови

Несмотря на то, что наличие специфического белка на поверхности эритроцитов является очень важным показателем, многие люди живут, не зная свой статус. Проверить резус-фактор можно и без направления врача, однако в ряде случаев анализ обязателен:

  • при подготовке к материнству и беременности;
  • при гемолитической болезни новорожденных;
  • при подготовке к хирургической операции, поскольку потенциально может понадобиться переливание крови или трансплантация;
  • если человек выступает донором или реципиентом крови, костного мозга или органов.

Подготовка к исследованию и забор биоматериала

Процедура взятия образца биоматериала ничем не отличается от обычного (например, общего) анализа крови: медсестра собирает в пробирку немного венозной крови (в некоторых клиниках — капиллярной), запечатывает и маркирует пузырек. Процедура практически безболезненна для пациента и отнимает всего несколько минут.

Если анализ будет проходить в частной лаборатории или клинике, то с правилами подготовки к нему обычно можно ознакомиться на сайте соответствующего медцентра. Обычно соблюдения строгого режима перед исследованием не требуется, однако желательно, чтобы с последнего приема пищи прошло не менее четырех часов. В случае приема лекарств лучше уточнить у медиков, не повлияют ли они на результат теста: некоторые лекарственные средства, например, препараты метилдопа, способны искажать показатели.

Как расшифровать результаты

Анализ на резус-фактор — один из самых быстрых в исполнении. По результатам исследования пациент получает бланк, в котором стоит отметка Rh+ либо Rh-. Первый вариант означает наличие специфического белка, то есть положительный резус, второй — отрицательный.

Внимательного отношения требует лишь отрицательный резус. Во-первых, следует сообщать о нем в случае хирургических вмешательств, переливаний крови. Врачи обычно назначают контрольный анализ резуса непосредственно перед операцией или трансфузией, и если его результаты не совпали с данными предыдущих исследований, то это повод провести тест повторно.

Во-вторых, особенное значение отрицательный резус-фактор имеет для женщин, планирующих материнство. Если отец ребенка резус-положителен, плод может также иметь специфический белок в крови. В этом случае возможен резус-конфликт: организм матери может начать «атаку» на ребенка, что вызывает ряд тяжелых последствий, вплоть до гибели малыша.

Какие еще анализы могут потребоваться при определении резус-принадлежности и почему?

Отсутствие в крови специфического белка резуса в настоящий момент не является препятствием для вынашивания здорового ребенка. При первой беременности вероятность конфликта невелика даже при разных резусах матери и малыша. Однако по правилам, чтобы обезопасить плод, при отрицательном резусе будущей маме (если отец ребенка при этом резус-положителен) придется сдать ряд дополнительных анализов.

В первую очередь, это анализ на резус-антитела. Исследование необходимо для того, чтобы выявить, произошел ли резус-конфликт, начал ли организм матери «атаковать» плод. Анализ сдается несколько раз в течение беременности: при постановке на учет, а начиная с 18-20-ой недель — ежемесячно. Если организм начал вырабатывать антитела, женщине вводят специальные препараты, предотвращающие резус-конфликт. В сложных случаях может понадобиться госпитализация будущей мамы.

Существуют способы, позволяющие узнать резус-фактор плода на ранних стадиях беременности. Подобные исследования проводят, например, по крови матери, с использованием методов молекулярно-генетических исследований. Если белок отсутствует, то нет необходимости в профилактике — конфликта в этом случае не произойдет. Однако даже в этом случае специалисты не рекомендуют женщинам отказываться от дополнительного наблюдения и анализов на антитела: при определении резуса плода вероятность ошибки выше, чем у стандартных исследований.

Где можно сдать кровь на резус-фактор и группу крови?

Узнать о наличии или отсутствии в крови специфического белка довольно просто: в настоящий момент такое исследование проводят практически в любом медицинском центре. Это и государственные больницы, и частные клиники и лаборатории, а также пункты сдачи крови. На последних мы не будем останавливаться подробно, так как все-таки это не специализированные учреждения для сдачи анализов и не каждый может похвастаться отсутствием противопоказаний для донорства.

В городских и муниципальных больницах исследование на резус-фактор проводят бесплатно (при наличии полиса ОМС), однако только по направлению терапевта. Недостатком также можно считать очереди и необходимость забирать результаты лично. Многие жалуются на длительные сроки ожидания результатов, использование устаревших методов исследования и низкую квалификацию персонала в отдельных клиниках.

Частные медцентры и лаборатории проводят анализ гораздо быстрее (как правило, от нескольких часов до 1–2 суток), а результаты можно узнать онлайн, по телефону или получить по электронной почте. Обычно в таких центрах не приходится тратить время на ожидание своей очереди и получать направление. Оборудование в частных клиниках часто совершеннее и современнее, чем в государственных. Из недостатков — услуга платная: цена анализа крови на резус-фактор обычно составляет несколько сотен рублей.

Резус-фактор, как и группу крови, должен знать каждый: в экстремальных ситуациях это знание может спасти жизнь человеку или его близким. В обязательном порядке свой резус необходимо узнать женщинам, планирующим рождение малыша. Чтобы быть уверенным в достоверности анализа, лучше выбирать надежные клиники и лаборатории, работающие в соответствии с требованиями мировых стандартов.

Не за­будь­те, что при за­бо­ре био­ма­те­ри­а­ла для опре­де­ле­ния ре­зус-фак­то­ра дейст­ву­ют те же пра­ви­ла, что и для об­ще­го ис­сле­до­ва­ния. По­это­му сто­ит пом­нить об огра­ни­че­ни­ях, что­бы ни­что не по­вли­я­ло на яс­ность кар­ти­ны ре­зуль­та­та. Не упо­треб­ляй­те спирт­но­го, со­ле­но­го, жир­но­го и коп­че­но­го за не­сколь­ко дней до про­це­ду­ры, за 6–8 ча­сов по­ста­рай­тесь не ку­рить. Не под­вер­гай­те ор­га­низм силь­ным физ­наг­руз­кам на­ка­ну­не.

Понятие о группах крови

Группы крови системы АВ0

Группы крови системы АВ0 были открыты в 1900 году К.Ландштейнером, который смешивая эритроциты одних лиц с сывороткой крови других лиц, обнаружил, что при одних сочетаниях кровь свертывается, образуя хлопья (реакция агглютинации), а при других нет. На основании этих исследований Ландштейнер разделил кровь всех людей на три группы: А, В и С. В 1907 году была обнаружена еще одна группа крови.

Было установлено, что реакция агглютинации происходит при склеивании антигенов одной группы крови (их назвали агглютиногенами), которые находятся в красных кровяных тельцах — эритроцитах с антителами другой группы (их назвали агглютининам), находящимися в плазме — жидкой части крови. Разделение крови по системе АВ0 на четыре группы основано на том, что кровь может содержать или не содержать антигены (агглютиногены) А и В, а также антитела (агглютинины) α (альфа или анти-А) и β (бета или анти-Б).

Читать еще:  Отзывы о салфетках для потенции el patron

Первая группа крови — 0 (I)

I группа — не содержит агглютиногенов (антигенов), но содержит агглютинины (антитела) α и β. Она обозначается 0 (I). Так как эта группа не содержит инородных частиц (антигенов), то ее можно переливать всем людям. Человек с такой группой крови является универсальным донором.

Вторая группа крови А β (II)

II группа содержит агглютиноген (антиген) А и агглютинин β (антитела к агглютиногену В). Поэтому ее можно переливать только тем группам, которые не содержат антиген В — это I и II группы.

Третья группа крови Вα (III)

III группа содержит агглютиноген (антиген) В и агглютинин α (антитела к агглютиногену А). Поэтому ее можно переливать только тем группам, которые не содержат антиген А — это I и III группы.

Четвертая группа крови АВ0 (IV)

IV группа крови содержит агглютиногены (антигены) А и В, но содержит агглютининов (антител). Поэтому ее можно переливать только тем, у кого такая же, четвертая группа крови. Но, так как в крови таких людей нет антител, способных склеиться с вводимыми извне антителами, то им можно переливать кровь любой группы. Люди с четвертой группой крови являются универсальными реципиентами.

Группы крови по системе АВО

Методика определения групп крови

Групповая принадлежность крови по системе АВО определяется при помощи реакции агглютинации. В настоящее время существует три способа опреде­ления групп крови по системе АВО:

— по стандартным изогемагглютинирующим сывороткам;

— с помощью моноклональных антител (цоликлонов анти-А и анти-В).

Определение групп крови по стандартным изогемагглютинирующим сывороткам

Суть метода сводится к обнаружению в испыту­емой крови групповых антигенов А и В с помощью стандартных сывороток. Для этих целей использу­ется реакция агглютинации. Пробу нужно делать в помещении с хорошим освещением при темпера­туре 15-25° С.

Для проведения пробы необходимы: — Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп О (I), А (II), В (III) и АВ (IV) двух различных се­рий. Сыворотки для определения групп крови изготав­ливают из донорской крови в специальных лаборато­риях. Хранятся сыворотки в холодильнике при темпе­ратуре 4 — 8° С. Срок годности сыворотки указывают на этикетке. На этикетке также указывается титр (то мак­симальное разведение сыворотки, при котором может наступить реакция агглютинации), который должен быть не ниже 1: 32 (для сыворотки В (III) — не ниже 1:16 /32). Сыворотка должна быть прозрачной, без при­знаков гниения. Стандартные сыворотки для удобства подкрашивают в определенный цвет: О (I) — бесцветная (серая), А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — ярко-желтая. Эти цвета сопутствуют всем этикеткам на пре­паратах крови, имеющих групповую принадлежность (кровь, эритроцитная масса, плазма и др.).

— Белые фарфоровые или эмалированные тарел­ки или другие пластинки со смачиваемой поверх­ностью, маркированные, согласно группам крови.

— Изотонический раствор хлорида натрия.

— Иглы, пипетки, стеклянные палочки (предмет­ные стекла).

Техника проведения реакции.

1. Под соответствующими обозначениями груп­пы крови на тарелку (пластинку) наносят сыворот­ку I, II, III групп в объеме 0,1 мл (одна большая капля диаметром около 1 см). Чтобы избежать оши­бок, наносят две серии сывороток, поскольку одна из серий может иметь низкую активность и не дать четкой агглютинации. Таким образом, получается 6 капель, образующих два ряда по три капли в сле­дующем порядке слева направо: 0 (I), А (II), В (III).

2. Кровь для исследований берут из пальца или из вены. Сухой стеклянной палочкой на пластину в 6 точек последовательно переносят 6 капель иссле­дуемой крови величиной примерно с булавочную го­ловку 0,01 мл (маленькая капля), каждую рядом с каплей стандартной сыворотки. Причем количество сыворотки должно в 10 раз превышать количество исследуемой крови. Затем их осторожно переме­шивают между собой стеклянными палочками с за­кругленными краями.

Возможна и более простая методика: на тарел­ку наносится одна большая капля крови, потом ее забирают оттуда уголком предметного стекла и переносят каждую каплю сыворотки, аккуратно перемешивая ее с последней. При этом кровь каж­дый раз берут чистым уголком стекла, следя за тем, чтобы капли не смешивались.

3. Смешав капли, тарелку периодически покачи­вают. Агглютинация начинается в течение первых 10-30 секунд. Но наблюдение следует вести не ме­нее 5 минут, так как возможна более поздняя агглю­тинация, например с эритроцитами группы А2 (II).

4. В те капли, где произошла реакция, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия, после чего оценивают результаты реакции.

Реакция агглютинации может быть положитель­ной или отрицательной

При положительной реакции в течение первых 10-30 секунд наблюдают в смеси видимые невоору­женным глазом мелкие красные зернышки (агглю-тинаты), состоящие из склеенных эритроцитов. Мел­кие зернышки постепенно сливаются в более круп­ные зерна или даже в хлопья неправильной формы. При отрицательной реакции капля остается равно­мерно окрашенной в красный цвет.

Результаты реакций двух серий в каплях с сыво­роткой одной и той же группы должны совпадать.

Принадлежность исследуемой крови к соответству­ющей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сы­воротками.

Если все сыворотки дали положительную реакцию, значит, испытуемая кровь содержит оба агглютиногена — А и В. Но в таких случаях, чтобы исключить неспецифическую реакцию агглютинации, следует провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной сывороткой группы АВ (IV).

Определение групп крови моноклональными антителами

Для определения групп крови этим способом используют моноклинальные антитела, которые по­лучают с помощью гибридомной, биотехнологии.

Гибридома — это клеточный гибрид, образованный путем слияния клетки костного мозга (миеломы) с иммунным лимфоцитом, который синтезирует спе­цифические моноклональные антитела. Гибридома обладает способностью к неограниченному росту, ха­рактерна для опухолевой клетки и присущей лим­фоциту способностью синтезировать антитела.

Разработаны стандартные реагенты-моноклональные антитела (МКА): цоликлоны анти-А и анти-В, при­меняемые для определения агглютиногенов эритроци­тов. Цоликлоны представляют собой лиофилизированный порошок красного (анти-А) и синего (анти-В) цвета, который разводят изотоническим раствором хлорида натрия непосредственно перед пробой.

Цоликлоны анти-А и анти-В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1 мл) под соот­ветствующими надписями: анти-А или анти-В. Ря­дом с каплями антител следует нанести по одной маленькой капле исследуемой крови. После переме­шивания компонентов наблюдают за реакцией агг­лютинации в течение 2-3 минут. Оценка результа­тов очень проста.

Определение групповой принадлежности крови может сопровождаться ошибками, которые ведут к неправильной трактовке результатов. Можно выде­лить три основные группы ошибок: ошибки, свя­занные с низким качеством реагентов; техничес­кие ошибки; ошибки, связанные с особенностями Схема оценки результатов определения групп крови спомощью моноклональных антител(цоликлоны анти-А и анти-В)исследуемой крови. Первых двух можно избежать, строго соблюдая описанные выше требования к сыво­ротке, условиям проведения реакции и др. Третья группа связана с явлением неспецифической панагглютинации (феномен Томсена), сущность которого состоит в том, что сыворотка при комнатной темпера­туре дает агглютинацию со всеми эритроцитами, даже со своими собственными (аутоагглютинация), а эрит­роциты в то же время дают агглютинацию со всеми сыворотками, даже с сывороткой группы АВ. Подоб­ное явление описано при ряде заболеваний: болезнях крови, спленомегалии, циррозе печени, инфекционных заболеваниях и др. Описана также панагглютинация и аутоагглютинация у здоровых людей.

Явление панагглютинации и аутоагглютинации наблюдается только при комнатной температуре. Если определение групповой принадлежности про­водить при температуре 37° С, они исчезают.

Нужно строго помнить, что во всех случаях не­четкого или сомнительногскрезультата следует про­вести повторное определение групп крови при по­мощи стандартных сывороток других серий, а так­же перекрестным способом.

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector
×
×